Document Type : Research Paper
Authors
Department of microbiology,College Of Veterinary Medicine, University of Duhok
Abstract
Ticks are harmful ectoparasite that feed on human and animal blood and causing many
diseases through the world. They infested many hosts including: mammals, reptiles and birds.
Ticks are important vector and they have the ability to transmit a variety of pathogenic agent to
humans and animals. Ticks are divided into two major groups which are hard tick (Ixodidae) and
soft tick (Argasidae). Because there was no such study done on identification of tick species by
PCR technique in Kurdistan and particularly in Duhok Governorate, therefore present study was
done to identify tick species by using molecular study by using of 16S rRNA and DNA
sequencing. About 1000 ticks were collected from both sheep and goat respectively (500 and
500), form Duhok Governorate including: Barwaria, Zakho, Sumeil, Mangeshik, Sersin, Shekhan
and Akre, Iraqi Kurdistan, between May and June 2016, between April and June 2017. The
results of present study three genera of tick were detected in small ruminants by microscopic
identification including: Rhipicephalus spp., Hyalomma spp. and Boophilus spp. Distribution of
tick among sheep and goat according to the gender, the rate of infection in female was higher
than in male in both species Ewe and Doe was 32.6% and 31.11% respectively as compared to
male in both species (Ram and Buck) was 21.15% and 15.11% respectively. The distribution of
gender of tick in was higher in male ticks than female tick with ratio 2:1. Distribution of
identified ticks in present study including (Rhipicephalus, Hyalomma and Boophilus)
respectively, in Barwaria were (82.6%, 13.3%, and 4.1) respectively, in Zaxo were (48.3%,
42.5% and 10.3%), in Sumel were (47%, 42.7% and 10.3%), in Mangeshik were (73,2%, 26.8%,
and 0%), in Sersink were (61.5%, 38.5% and 0%), in Shekhan were (78.8%, 11.8% and 9.4%)
and in Akre were (60%, 34% and 6%). On molecular study, 60 samples from 150 were positive
with size 460 bp after 16S rRNA amplification and have got clear bands on agarose gel 1% and
electrophoresis and 20 PCR positive products were sent to Humanizing Genomics, Macrogen
Company (Korea) using primer 16S_rRNA gene for sequencing both forward and Reverse. Six
species of tick under two genera were founded including: Rhipicephalus and Hyalomma were
identified which including: Hyalomma anatolicum, H. marginatum, R. annulatus, R. sanguineus
and R. turanicus. H. asiaticum asiaticum for the first time was recorded in Kurdistan, and
especially in Duhok city. Moreover, all sequences were submitted to NCBI using BankIt
software and we obtained accession number. Phylogenetic tree was constructed based on 16S
rRNA for both samples: 16S rRNA (MN594483) and (MN594490) were identical 100% to
reference sequences respectively: (KU664367.1 and HM176656.1) and other sequences were
identical 99% to the references sequence. In conclusion the present study is the first study for
identification of tick species among sheep and goats in Duhok Governorate, Iraqi Kurdistan by
sequencing analysis
Keywords
Article Title [العربیة]
دراسة شکلیة و جزئیة لانواع القراد الصلب التی تصیب المجترات الصغیرة فی محافظة دھوک /کوردستان العراق
Abstract [العربیة]
تمت خلال الدراسة الحالیة دراسة شکلیة لتصنیف القراد والبایروبلازم الناشئ عن القراد فی الدم وایضاً فی القراد. ُجمعت
حوالی ١٠٠٠من القراد بواقع ٥٠٠فی کل من الأغنام والماعز على التوالی، مع ١٠٠عینة من الدم من الحیوانات وایضاً
الغدد اللمفیة المتضخمة فی المناطق حول محافظة دھوک )برواری، زاخو، سمیل، سرسنک، شیخان، وعقرة( للفترة من مایس
الى حزیران ،٢٠١٦ومن نیسان الى حزیران ،٢٠١٧
أظھرت نتائج الدراسة الحالیة وخلال فترة الدراسة ثلاثة أنواع جینیة من القراد قد تم تحدیدھا فی المجترات الصغیرة من
خلال الفحص المجھری وتضمنت أنواع من کل من أسماء علمیة Rhipicephalus, Hyalommaو . Boophilusدرس
من
ٍلا
انتشار القراد بین الأغنام والماعز اعتماداً ُ على الجنس، حیث کانت نسبة الإصابة بین الاناث اعلى منھا فی الذکور وفی ک
النِ ِ عاج والم َع ٌ از حیث کانت: %٣٢.٦و %٣١.١١على التوالی، فیما کانت فی ذکور الاغنام والماعز )الکبش والتیِس(:
%٢١.١٥و %١٥.١١على التوالی. فیما لوحظ ان توزیع جنس القراد اعلى منھ فی الذکور مقارنة بالإناث وبنسبة .٢:١من
ُ ناحیة أخرى کان توزیع القراد الم ُ شخص فی الدراسة الحالیة متضمنة أسماء علمیة )Hyalomma ،Rhipicephalus
و (Boophilusعلى التوالی: فی منطقة برواری کانت ) ،%١٣.٣ ،%٨٢.٦و ،(%٤.١زاخو )،%٤٨.٣
،%٦١.٥) %(، سرسنک٠%، و٢٦.٨ ،%٧٣.٢) (%، مانکیش١٠.٣%، و٤٢.٧ ،%٤٧) (%، سمیل١٠.٣%،و٤٢.٥
،%٣٨.٥و ،(%٠شیخان ) ،%١١.٨ .%٧٨.٨و (%٩.٤وفی عقرة کانت ) ،%٣٤ ،%٦٠و .(%٦وفیما یتعلق بالدراسة
الجزیئیة ٦٠عینة من مجموع ١٥٠عینة کانت موجبة مع حجم ٤٦٠قاعدة نیتروجینیة ) (base pairبعد تضخیم
الحامض النووی الریبی الرایبوسومی ) (16S rRNAوفقد تم الحصول على ُحزم واضحة من خلال استخدام الاکاروز %١
وجھاز الترحیل الکھربائی ) ،(Electrophoresisوتم ارسال ٢٠عینة موجبة لتقنیة تفاعل البولیمیریز المتعدد الى
.( لمعرفة التسلسل الجینی16S rRNA) باستخدام جینHumanizing Genomics, Macrogen Company (Korea)
اظھرت النتائج وجود ستة أنواع من القراد تحت ھذه الاجناس: Rhipicephalusو ُ Hyalommaحیث شخصت الأنواع: .H
. ولأول مرة فی کوردستانanatolicum, H. marginatum, R.annulatus, R. sanguineus and R. turanicus
وخاصة فی محافظة دھوک تم تسجیل الجنس: .H. asiaticum asiaticumإضافة الى ان کل التسلسلات الجینیة رفعت الى
المرکز الوطنی لمعلومات التکنولوجیا الحیویة NCBIباستخدام برنامج ال BankItوتم الحصول على رقم الانضمام من قبل
بنک الجینات ومن ثم شجرة النشوء والتطور تم انشاؤھا بالاعتماد على ) (16S rRNAفی کلتا العینتین 16S rR
(MN594483و ) 16S rRNA (MN594490کانت مطابقة %١٠٠لمصادر التایة ُ وحددت الأرقام التسلسلیة الجینیة
کالآتی: ) (KU664367.1 and HM176656.1على التوالی. اما بقیة التسلسلات الجینیة کانت مطابقة %٩٩لمصادر
التسلسلات الجینیة. واخیراً اظھرت نتائج الدراسة الجزیئیة للبایروبلازم فی الدم %٢٥موجبة.
کاستنتاج عتبر الدراسة الحالیة ھی اول دراسة لتصنیف أنواع القراد بین الأغنام والماعز فی محافظة دھوک، وفی
کوردستان العراق من خلال تفاعل البلمرة المتعدد وفحص التسلسل الجینی
)
