Authors

Abstract

The local Streptomyces sp. strain showed an ability to produce antimicrobial metabolite active against standard strains, in primary and secondary screening. The produced antibiotic was extracted, purified and identified as a peptide antibiotic produced about 1.4g/L in 7 days incubation period, and its LD50 was 5500.
There was an inverse effect for orange acridine dye on the grown colonies number of S. sp., the 28 g/ml dye concentration was chosen as the best concentration because it led to colonies killing by 95%. Plasmid DNA extracted from S. sp. and then transformed to E. coli pBR 322, the E. coli pBR 322 showed negative results against the standard strains in primary screening before plasmid DNA transformation, while transformed E. coli pBR322 showed positive results. The antibiotic produced by trans. E. coli pBR322 was extracted, purified and identified by the same ways, which gave the same antibiotic produced by S. sp. with an increase of 2.2 g/L in the quantity and shorter period of time (2 days).

Keywords

Article Title [العربیة]

عزل الــ DNA البلازمیدی من بکتریا Streptomyces sp. ونقله الى Escherichia coli pBR332

Authors [العربیة]

  • فوزیة علی عبدالله
  • مرتقب يونس عبيد

Abstract [العربیة]

اظهرت العزلة المحلی Streptomyces sp. القدرة على انتاج مادة ذات فعالیة مضادة للجراثیم القیاسیة فی الغربلة الاولیة والثانویة, تم عزل وتنقیة وتشخیص المضاد المنتج وکان ذوطبیعة ببتیدیة وامتلک نصف جرعة قاتلة 5500 ملغم/کلغم, وانتج بکمیة محدودة 1.4غم/لتر فی سبعة أیام. اظهرت نتائج المعاملة بالاکردین ان عدد المستعمرات النامیة یتناسب عکسیا مع کمیة الاکردین المضافة للوسط ، حیث بلغت 95%نسبة القتل عند ترکیز 28μg/ml حیث تم اختیاره کترکیز افضل لترحیل البلازمید. استخلص الـDNA البلازمیدی من S. sp.. ومن ثم نقل البلازمید الى بکتریا الـE. coli pBR322 حیث اظهرت هذه البکتریا صفة انتاج مضاد بکتیری فی الغربلة الاولیة لم تکن تمتلکها قبل عملیة النقل. ومن ثم تم عزل, تنقیة وتشخیص المضاد المنتج من الـE. coli pBR322 trans. بنفس الطریقة المستعملة لعزل, تنقیة وتشخیص المضاد المنتج من S. sp. ، وکان هذا المضاد هو نفس المضاد المنتج من بکتریا S. sp. وبکمیة اکبر2.2غم/لتر فی فترة زمنیة قصیرة (یومین).